1.昆明市第三人民医院检验科 2.结核科 3.中西医结合科,云南 昆明650041;4.厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,福建 厦门 361005

摘要:
目的:探讨结核分枝杆菌相关γ-干扰素体外释放(TB-IGRA)定量试验,对于结核病诊断的应用价值。
方法:用国产TB-IGRA试剂定量检测342例结核病患者。143例非结核病患者外周血特异性γ-干扰素的含量,同时与澳大利亚QFT GIT和英国牛津T-SPOT.TB试剂进行平行比较分析。
结果:TB-IGRA试剂对结核病患者的检测阳性率为90.1%,且对肺结核与肺外结核的检测差异无统计学意义,检测结果不受BCG的影响,与QFT GIT和T-SPOT.TB试剂比较,3种方法差异无统计学意义。
结论:TB-IGRA检测结核分枝杆菌有较高的敏感性,对于结核病的诊断及预防有较好的应用价值。
关键词:γ-干扰素释放反应;结核分枝杆菌;结核病;诊断
中图分类号:R378.91   文献标识码:A   文章编号:1005-4529(2012)13-2952-03

【Abstract】
OBJECTIVE To evaluate the application value of MTB related IFN-γ release assay(TB-IGRA) for the diagnosis of tuberculosis.
METHODS We detected the specific IFN-γ content in peripheral blood of 342 tuberculosis patients and 143 non-tubercular people with homebred TB-IGRA, in the meantime, did the same detections with QFT GIT from Australia and T-SPOT.TB from Oxford UK as parallel controls.
RESULTS The positive rate of TB patients was 90.1% with TB-IGRA, and there were no significant differences between the detection of pulmonary tuberculosis and extrapulmonary tuberculosis, without BCG affecting this, as compared with QFT GIT and T-SPOT.TB, there were no significant differences among the 3 methods.
CONCLUSION TB-IGRA has high sensitivity to the detection of Mycobacterium tuberculosis and preferable application value in the diagnosis and prevention of tuberculosis.
【Key words】 Interferon-gamma release assay; Mycobacterium tuberculosis; Tuberculosis; Diagnosis

结核病是一种由结核分枝杆菌(MTB)感染,引起的严重危害人类健康的慢性呼吸道传染病,是我国重点控制的重大疾病之一,也是全球关注的公共卫生问题和社会问题。作为一种可以复燃的疾病,结核病的疫情一直居高不下,如何快速诊断和治疗,对防止结核病的传播意义重大。近年来,一种以T细胞为基础的体外γ-干扰素释放试验(IGRA)得到了较快的发展,对检测MTB具有很高的特异性和敏感性,在欧美国家已经成为结核临床常规检测方法之一。本试验采用国产结核分枝杆菌相关γ-干扰素定量检测试剂盒(TB-IGRA),对医院确诊的结核病和非结核病患者进行检测,同时与国外同类试剂进行平行比较分析,拟评价不同方法对结核病诊断的应用价值。
1 资料与方法
1.1 临床资料 结核病患者342例,男性207例,女性135例,平均年龄(37.48±15.78)岁,为结核科住院患者,治疗<1周,所有患者均经临床或细菌学确诊,其中肺结核324例,肺外结核18例。非结核对照组143例,男性86例,女性57例,平均年龄(42.40±12.88)岁,为内科住院的肺部疾病患者39例,有明确的非结核临床诊断结果,以及健康体检者104例。所有被检人员均排除原发性免疫缺陷性疾病、接受放化疗以及免疫抑制药物治疗、结核病合并糖尿病等免疫损害者。
1.2 试剂与仪器  主要试剂为北京万泰生物药业股份有限公司研制的结核分枝杆菌相关γ-干扰素定量检测试剂盒(TB-IGRA),澳大利亚Cellestis公司的QFT GIT试剂盒,英国牛津Immunotec生产的T-SPOT.TB试剂。主要仪器为MK-3酶标仪(芬兰雷勃),Heal Force二级生物安全柜,37℃恒温箱,洗板机(BD-TEK-ELX50),RIVCO CO2孵育箱等。
1.3  检测方法  所有操作均严格按照3种试剂盒的说明书进行。
1.4 统计处理  采用SPSS11.0版软件,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两种方法检测阳性率  用TB-IGRA与QFT GIT两种方法,对342例结核病患者及143例非结核患者进行检测,对结核病患者的检出率分别是90.1%、87.7%,两种试剂的符合率为94.4%;用TB-IGRA与T-SPOT.TB两种方法,对100例结核病患者进行检测,检测阳性率分别是91.0%、89.0%,两种试剂的符合率为86.0%,差异均无统计学意义。
2.2 TB-IGRA对结核及非结核检测阳性率  342例结核患者标本中,TB-IGRA试剂总的检出率为90.1%,其中肺结核标本324例,TB-IGRA试剂的检出率为90.4%,肺外结核标本18例,TB-IGRA试剂的检出率为83.3%,TB-IGRA试剂对肺结核与肺外结核两种标本的检测效果,差异无统计学意义。143例非结核患者标本中,TB-IGRA试剂的检出率为23.1%,其中对其他疾病患者的检出率为30.6%,略高于对健康人检出率的20.2%;143例非结核患者中,已接种BCG的57例,未接种BCG的54例,BCG接种情况不明的群32例,TB-IGRA试剂对BCG接种人群的检出率为26.3%,略高于BCG未接种人群的检出率的16.7%,差异均无统计学意义。见表1、表2。

表1  TB-IGRA与QFT GIT、T-SPOT.TB检测阳性率(%)比较

Table 1   The positive rates (%) of the deteciton of TB-IGRA and QFT of GIT,T-SPOT.TB

表2  TB-IGRA对结核、非结核、BCG的检测阳性率(%)

Table2  The positive rates(%) of the detection of TB-IGRA to TB, non-TB and BCG

3 讨论
体外γ-干扰素释放试验(IGRA),是通过检测机体的细胞免疫功能,来判断是否存在结核分枝杆菌感染。人体初次感染结核菌后,使T淋巴细胞转化为记忆T淋巴细胞,当人体再次接触结核分枝杆菌后,会迅速产生效应T淋巴细胞,释放多种细胞因子,其中γ-干扰素(IFN-γ)是最关键的细胞因子。在机体外用分枝杆菌特异抗原刺激受试者外周血单个核细胞(PBMC),若其中含有记忆T淋巴细胞,就会分泌大量IFN-γ,测定分离至全血或单个核细胞的INF-γ释放水平,可以判断是否有MTB感染。目前应用的IGRA主要有两种方法,一种是QuantiFERO-TB GOLD(QFT GIT)试验;另一种为T-SPOT.TB试验。这两种方法已在多个国家批准使用,但两种试剂的价格都非常昂贵,为250~500元/人份,限制其在发展中国家的应用。
本试验所用试剂TB-IGRA、QFT GIT和T-SPOT.TB所选用的抗原ESAT-6、CFP-10,是致病性结核分枝杆菌特有,而卡介苗没有的片段,能够较好的区分真性结核感染,排除BCG接种等方法产生的干扰。本研究结果显示,TB-IGRA与QFTGIT和T-SPOT.TB对结核患者的检测阳性率分别为90.1%、87.7%、89.0%,3种试剂比较,检出率差异无统计学意义。TB-IGRA试剂对结核病患者的检出率较高为90.1%,与张华等国内文献报道一致,且对肺结核与肺外结核的检测差异无统计学意义。由此可见,国产的试剂性能与进口试剂相当,而且成本方面更具优势,对于结核病的诊断及预防有较好的应用价值。

 

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体外γ-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较

2014/9/5 0:00:00

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